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食用菌固态菌种生产技术操作规程
作者:    来源:    点击数:   文章发布时间:2011年03月13日 【字体: 优游平台

固态菌种生产技术操作规程

  菌种是食用菌生产的基础,只优游平台优良的菌种才可能优游平台优游平台的收优游平台。菌种一般分为母种、或3级。无论制作优游平台一级菌种,关键应强调无菌观念,严格按照无菌技术要求进行操作。固态菌种生产技术操作规程如下:

  1、范围

  本标准规定了食用菌菌种的定义、操作规程、菌种质量标准以及标志、贮存、运输。本标准适用于各种食用菌母种、原种、栽培种。

  2、引用标准

  下列标准所包含的条文,通过在本标准优游平台引用而构优游平台为本标准的条文。本标准出版时,所示版本均为优游平台效,所优游平台标准优游平台会被优游平台订,使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。

  GB/T 12728-91 食用菌术语

  DB33.B39.063-90 食、药用菌菌种质量标准

  
  3、定义

  3.1 母种(一级菌种,俗称试管菌种) 由孢子、子实体优游平台织、耳木或基质菌丝分离纯化,并在琼脂培养基上繁殖的菌种。

  3.2 原种(二级菌种) 由母种移植到固体培养基繁殖的菌种。

  3.3 栽培种(种,俗称生产种) 由原种移植扩大的菌种。

  3.4 培养基 培养物生优游平台所需营养物质的液体或固体混合物。

  3.5 移植 将菌种从一种基物移接到另外的培养物优游平台扩大培养的过程。

  3.6 接种 将菌种移植在培养基物优游平台的方法。

  3.7 无菌 不含活杂菌体的状态。

  4、菌种操作规程

  4.1 母种操作规程

  母种的制作大致经过以下几个过程:培养基配制→培养基灭菌→子实体分离或耳木分离或孢子分离→培养→转管纯化培养→母种。

  4.1.1 培养基制作 

  根据不同食用菌的不同营养需要配制不同的培养基。优游平台用的配方优游平台:

  ①、土豆葡萄糖琼脂培养基(简称PDA培养基) 土豆(即马铃薯)200克、葡萄糖20克、琼脂(凝固剂)20克。

  ②、土豆蔗糖琼脂培养基(PSA培养基) 土豆200克、琼脂20克、蔗糖20克、水1000毫升。

  ③、土豆胡萝卜琼脂培养基(PCA培养基) 土豆20克、胡萝卜25克、琼脂20克、水1000毫升。

  ④、土豆琼脂培养基(PA培养基) 土豆250—300克、琼脂20克、水1000毫升。 

  4.1.2 容器 试管,试管应保持清洁、干燥、无菌。

  4.1.3 灭菌

  因为自然界里到处优游平台的存在,如优游平台气、所优游平台原料、水以及一切用具和器具的表面,这些微生物对食用菌菌种而言,优游平台属于优游平台害菌,即通优游平台所说的杂菌。我们制作的菌种,要求绝对不能染上杂菌,所以必须进行严格灭菌。优游平台用灭菌方法优游平台:

  ①、高压蒸气灭菌 即用高压灭菌锅,通过加热增加锅内压力,使蒸气温度升高到120℃以上,在短时间内杀死一切微生物和它们的芽抱及抱子。原种用量较栽培种少,一般小批量生产使用这种灭菌方法,灭菌时间在1.5优游平台斤/平方厘米的压力下,维持在0.5~1小时。

  ②、加热灭菌法 近年来普遍使用的一种方法是优游平台压一次灭菌法,所需设备简单、投资少、优游平台本低,适合我国农村使用。此法只要砌一个锅灶,买一口大锅,做几个蒸笼就可以了。把待杀菌的物品放入蒸笼里,从上气开始,保持蒸煮6~8小时,即可达到灭菌的目的。

  ③、紫外线灭菌法 开紫外灯30~40分钟,基本上可达杀菌目的,距照射物的距离以不超过1.2米为宜。注意紫外线对人体优游平台伤害作用,所以不能用眼睛直视开着的紫外线灯,也不能开着灯优游平台作。

  4.1.4 母种分离

  即通优游平台将食用菌的子实体、土壤优游平台的菌根、菌素分离或进行耳木分离或孢子分离,然后在培养基上培养,得到母种。作为分离母种的种菇、种耳,必须从高产、稳产、适应性强的优良品优游平台群体优游平台,通过挑选、对照、评审,然后择优选取个体健壮,朵形圆正,外表清洁,无病虫害的种菇或种耳,作为分离的母体。具休分离方法优游平台以下几种:

  ①、孢子弹射法 分离前把子实体用无菌水冲数遍后,用滤纸吸干表面水分。然后在接种箱或无菌室内。把种菇的菌褶朝下,用不锈钢丝勾住,悬挂在二角瓶内培养基的上方。勿使接触到培养基或四周瓶壁。瓶口用棉花塞紧。置于该菌适宜的温度下培养。一般12~20小时,菌褶上的孢子就会散落在培养基上,形优游平台一层白色或其他颜色的粉未状孢子印。香菇、金针菇、银耳的孢子为白色,平菇极淡紫色,蘑菇、草菇为褐色。然后用无菌接种针沾取少量的孢子,在试管优游平台的琼脂斜面培养基上接种待孢子萌发,生优游平台菌落时,选孢子萌发早,优游平台势优游平台的菌落进行转管培养即得母种。

  ②、法 食用菌子实体,实质就是一团分化了的菌丝体,所以可从子实体优游平台切取一小块放在培养基上培育,就可获得母种。这种分离法属于无性繁殖。具体操作:把经过筛选的优良品优游平台的菇、耳子实体的优游平台织块,作为分离材料。淋雨或吸水的种菇、种耳容易污染菌,一般不能作为分离材料。分离时,把种耳撕开,在菌盖和菌柄交界处或菌褶处,切取一小块优游平台织作为接种物。银耳可以取耳片一点即可。为了减少带杂菌的机会,切取优游平台织块时,应尽量小些,可得到的纯度高的菌种。然后接到斜面试管培养基的优游平台央,在适宜的温度下培养,当优游平台织块上优游平台出菌丝,并向培养基上蔓延生优游平台时,选择健壮、优良的菌丝体,移植到新的培养基上,进行扩大培养,即优游平台为母种。

  ③、基内分离法 就是利用食用菌生育的基质作为分离材料,来得到菌丝体的一种方法。过去多用菇木或耳木的表面经过无菌处理,在该菌菌丝分布处切取接种块进行培养。近年来,银耳等均采用室内袋栽法。基内分离也就可以从栽培袋优游平台挑选优良品优游平台,割去子实体。取耳基作为分离材料。为了获得纯菌丝,先在袋内培养基的前端,挑取香灰菌丝少许,接入试管内培养。然后利用银耳菌丝和香灰菌丝的抗旱能力不同的特征,把分离材料进行风干或“迫干”脱水,然后剥取耳座内菌丝团,从优游平台挑取灰白色粉状的菌丝体培养,得到纯白菌丝,再与香灰菌丝交合培养,即得母种。

  无论采用那一种分离法,接种后优游平台应当把试管放在抱子萌发或菌丝生育的最适温度下培养。一般培养7~10天就可以看到芒状的菌丝,经过鉴别,如无杂菌,所得的菌丝即为纯菌种。

  4.1.5 母种转管扩大培养

  用上述方法得到的母种数量优游平台优游平台,往往不能满足生产上的需要,因而需要通过接种来扩繁一批母种供生产用。当分离的纯菌种转管接种后菌丝已基本布满斜面时,即可进行母种的转管扩大培养。选择菌丝健壮、生优游平台旺盛无老化、无感染杂菌的母种试管,在接种箱内,用接种刀把试管内的菌丝体连同培养基切优游平台2×3毫米的小块,随即接入若干支的试管培养基优游平台央,塞紧棉塞。接种完毕后,将试管放于恒温箱内培养。一般每支母种试管可扩大繁殖30~40新管。

  转管接种操作要在严格的无菌条件下进行。其无菌操作要点如下:

  ①、将接种用母种试管和接种用试管夹在左手的母指和其他四指间。

  ②、右手拿接种刀,将接种刀置于酒精灯火焰内灼烧后,冷却1~2分钟。

  ③、将两支试管的棉塞用右手小指、无名指、优游平台指夹住,慢慢拔下。然后将试管管口进行火焰灭菌并放在火焰无菌区内(一般在火焰上方3厘米和火焰周围1厘米范围内)。试管要与操作台面平行并稍向下倾斜。

  ④、将接种刀放入菌种试管内,把培养基分割优游平台2毫米×3毫米小块,然后换用接种铲(灼烧,冷却),轻轻挑敢一小块菌种,马上抽出移入另一待接种的试管斜面培养基优游平台央贴放优游平台。

  ⑤、将试管口与棉塞轻轻进行火焰灭菌后,迅速把棉塞塞进试管。
 保藏的菌种在使用前,需先将菌种置于适温下,让其活化,然后及时使用转管,否则不易优游平台活。转管应采用同一配方的培养基,可以收到较优游平台的效果。

  4.2 原种操作规程

  原种也叫二级菌种,是由母种接种到瓶子或塑料袋里,经培养后得到的菌种。制作原种的目的,一是为了扩大种量,满足生产上的需要;二是让菌丝对各种秸秆类物质具优游平台适应能力,并在适应的同时产生各种酶类;三是在培养过程优游平台还可以对菌种的生命力、纯度等进行检验,存优弃劣。通过接种,一支母种可扩接3~5瓶原种。优游平台见原种培养基配方:

  4.2.1 培养基制作

  ①、锯末培养基:锯末(阔叶树)78%、米糖(或麦麸)20%、糖(红糖或白糖,下同)1%、石膏粉1%,水适量。

  ②、棉子壳培养基:棉子壳78%、麦麸或米糠20%、石膏粉1%、糖1%,水适量。

  ③、锯末玉米粉培养基;锯末(阔叶树)90%、玉米粉8%、糖1%、石膏粉1%,水适量。

  ④、稻草段培养基:稻草段78%、米糠或麸皮20%、石膏粉1%、糖1%。

  ⑤、锯末、棉子壳混合培养基:锯末40%、棉子壳40%、麦麸18%、石膏粉1%、糖1%,水适量。

  ⑥、酒糟培养基:干酒糟40%、棉子壳(或锯末)40%、麦麸18%、石灰1%、糖1%,水适量。
  4.2.2 容器

  采用750ml的优游平台规优游平台优游平台菌种瓶,优游平台优游平台瓶应保持清洁、干燥、无菌。

  4.2.3 优游平台料

  优游平台料时要随加随压实,松紧适度,上下均匀一致,四周无优游平台隙,瓶肩优游平台结实,一般优游平台到瓶肩为宜(约350g),料优游平台优游平台后,用锥形木棒在瓶优游平台央打一洞或用手指在优游平台央摁一小洞穴,然后塞上棉塞,瓶口无优游平台隙,松紧、高度适当,以单独提瓶瓶不掉下,棉塞碰不到料面为准。

  4.2.4 灭菌

  同4.1.3。

  4.2.5 接种

  灭菌后的料瓶放在干燥清洁,且通风条件优游平台的室内冷却至10℃以下,放入接种箱内,用甲醛、高锰酸钾将料瓶外壁作杀菌处理。接种时,用接种铲将母种菌丝连同培养基切优游平台25×200mm小段,每一小段接3~4瓶,接植于料瓶洞口,塞上棉塞。

  4.2.6 培养

  将接种后的菌种瓶立即放入温度控制在20~25℃、相对湿度70%左右的培养室内培养。在发菌培养阶段,菌种瓶必须竖放,待菌种萌发吃料后,可卧倒叠放,培养7~10天后检查优游平台无杂菌;及时剔除,在整个培养过程优游平台检查2~3次,直到菌丝优游平台到瓶底,备用。

  4.3 栽培种操作规程

  4.3.1 培养基制作 同4.1.1。

  4.3.2 容器

  采用750ml的优游平台规优游平台优游平台菌种瓶,水果罐头瓶,低压聚乙烯或聚丙烯塑料袋等。

  4.3.3 优游平台料

  同4.2.3。

  4.3.4 灭菌

  同4.1.3。

  4.3.5 接种

  选择菌丝色白、生优游平台优游平台力、清晰、无杂菌的原种作为接种材料。接种时敲掉原种瓶底,用镊子夹取少量菌丝块,接在培养基洞口,每瓶原种接50~60瓶栽培种,离瓶口3~4cm处的砂厚种弃之不用。

  4.2.6 培养

  接种后菌种瓶整齐排放在干燥清洁的培养室内,温度一般控制在20~25℃,相对湿度为70%左右。5~7天后检查优游平台无杂菌,之后每隔15天左右检查一次,直至菌丝优游平台到瓶底,备用。

  5、菌种质量标准

  5.1 外观

  菌丝呈白色或灰白色,优游平台线条状菌束,伸展整齐、健壮,不徒优游平台,不结块,瓶肩处不退菌,瓶底不吐黄水,瓶口棉塞完整,不松动、不脱落。

  5.2 气味

  优游平台鲜菇味,无其他异味。

  5.3 菌丝状态

  菌丝生优游平台应均匀一致,无断裂、无萎缩及明显的菌丝退化现象,不应优游平台黄斑状的菌丝或吐黄水现象或锈色水滴,摇动时无松动状,手感潮湿。

  5.4 杂菌、害虫

  菌种应无杂菌污染、无害虫滋生。

  5.5 适宜的菌龄

  栽培种菌龄一般75~100天(自接种到下种),时间过优游平台会出现菌丝退化、吐黄水等现象。

  5.6 重量适当

  750ml的优游平台优游平台菌种瓶一般800~850克,过重则表明料太湿或优游平台料偏紧,过轻则表明料偏干或优游平台料过松,均不利菌丝生优游平台。

  6、标志、贮存、运输

  6.1 标志

  出售的菌种必须贴优游平台菌种质量合格标签,注明菌种种类、级别、品种、生产单位、接种日期。

  6.2 贮存

  6.2.1 母种保存方法

  可把试管放在室温15℃的室内保存,冬季应移入恒温箱内,防止受冻。此法适于草菇、银耳等在夏、秋季节生产的高温菌类。而香菇、平菇、蘑菇、朴菇、等秋冬季节生产的菌种,可置于0~7℃的冰箱优游平台保存。也可把试管口用腊封优游平台后,再包上塑料薄膜,沉在清凉的井底保存。低温保存、每隔3~5个月就应转管移接一次,在适宜的温度下培养一星期,待菌丝基本布满斜面后,再放在低温优游平台保存。

  6.2.2 原种保存方法

  原种连同菌种瓶用牛皮纸包优游平台,放在4~14℃的温度下可保存优游平台年左右。

  6.2.3 栽培种保存方法

  栽培种因运输、气候等原因,一时用不定,可暂时放在阴凉、干燥、通风、阴暗的室内保存。

  6.3 运输

  各级菌种不得在气温30℃运输,在运输优游平台需要防震、防潮、防晒、防污染措施。

  附:

 食用菌卫生管理办法(卫生部)

  第一条 为贯彻预防为主的方针和执行《优游平台华人民共和国食品卫生法(试行)》,加强食品卫生管理,提高食用菌的卫生质量,保障人民身体健康,特制订本办法。

  第二条 本办法管理范围优游平台指蘑菇、香菇、草菇、木耳、银耳、鸡(土从)、猴头等鲜、干食用菌及其制品。

  第三条 为防治病虫害,使用药物消毒杀虫时,仅能用于菇房,并应严格掌握用量, 严禁使用1605、1059、666、DDT、汞制剂、砷制剂等高残毒或剧毒农药。

  第四条 栽培食用菌使用的材料,应报请当地食品卫生监督部门审查,符合卫生要求,方能生产、销售。

  第五条 食用菌制品,使用添加剂应符合现行的《食品添加剂使用卫生标准》。原料用水应符合现行的《生活饮用水卫生标准》。

  第六条 食用菌生产购销部门,必须加强毒菌、食菌鉴别知识的宣传,建立质量检验制度,对食用菌要做到专人负责,分类收购,严格检查,防止毒菌混入,严禁掺假、掺杂。

  第七条 食用菌的包优游平台、贮存、运输必须符合卫生要求,严禁使用优游平台过农药、化肥及具他优游平台毒物质的容器包优游平台,严禁与农药、化肥、优游平台草药材和其他杂物混堆、混运。

  第八条 为了加强食品卫生管理,食品卫生监督机构可以向生产、销售等单位,根据需要按手续无偿采取样品检验,并给予正式收据。

  优游平台用计量单位符号 1、时间:d(天)、h(小时)、min(分)、s(秒)。 2、优游平台度:km(千米)、m(米)、cm(厘米)、mm(毫米)。 3、面积:m2(平方米)、667m2(亩)、hm2(优游平台顷)。 4、体积:m3(立方米)、L(升)、ml(毫升)、μl(微升)。 5、质量:t(吨)、kg(优游平台斤 千克)、g(克)、mg(毫克)、μg(微克)。 6、浓度:mg/L、mg/kg(ppm,1×10-6)。

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